Table 1

IgG isotypes for mice of different haplotypes (H-2b, H-2k, H-2q, H-2d). Estimation of IgG isotypes for different peptide formulations in mice bearing haplotypes H-2b(1A), H-2k(1B), H-2q(1C), H-2d(1D). Levels of IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 and determined as described in Materials and Methods at fixed antisera dilution (1:100). IgG2a,2b,2c and IgG3 were determined using ELISA in all the three bleeds for all the four peptides in different antigenic formulations using the isotyping kit. The O.D. values represent mean ± SEM of sixteen mice (four for each haplotype) as studied for the bleeds obtained on 27th (I), 42nd(II), and 60th (III) day.

Table 1A (H-2b)

Formulation
Peptide in Alum
Peptide in Liposomes
Peptide with MA729 in Liposomes
Peptide in ISCOMs

Isotype↓ Bleed→
I
II
III
I
II
III
I
II
III
I
II
III

V3-gp41 Peptide

IgG1
0.58 ± 0.10
0.56 ± 0.02
0.36 ± 0.05
0.18 ± 0.02
0.32 ± 0.05
0.43 ± 0.10
0.32 ± 0.06
0.58 ± 0.10
0.30 ± 0.12
0.32 ± 0.10
0.45 ± 0.17
0.29 ± 0.10
IgG2a
0.67 ± 0.16
0.76 ± 0.10
0.45 ± 0.02
0.56 ± 0.07
0.65 ± 0.14
0.50 ± 0.10
0.54 ± 0.12
0.78 ± 0.20
0.73 ± 0.21
0.95 ± 0.30
1.24 ± 0.26
1.10 ± 0.31
IgG2b
0.78 ± 0.10
0.74 ± 0.25
0.67 ± 0.10
0.98 ± 0.22
1.20 ± 0.42
1.49 ± 0.36
1.35 ± 0.33
1.34 ± 0.21
1.50 ± 0.18
1.54 ± 0.09
1.23 ± 0.39
1.43 ± 0.32
IgG3
0.43 ± 0.17
0.32 ± 0.12
0.37 ± 0.04
0.54 ± 0.10
0.43 ± 0.08
0.40 ± 0.05
0.60 ± 0.10
0.70 ± 0.10
0.45 ± 0.06
0.60 ± 0.10
0.58 ± 0.03
0.43 ± 0.05

gp41 Peptide

IgG1
0.10 ± 0.01
0.12 ± 0.01
0.10 ± 0.03
0.10 ± 0.04
0.42 ± 0.05
1.16 ± 0.10
0.10 ± 0.03
0.27 ± 0.02
0.30 ± 0.06
0.10 ± 0.01
0.14 ± 0.02
0.10 ± 0.01
IgG2a
0.13 ± 0.02
0.21 ± 0.02
0.11 ± 0.01
0.10 ± 0.01
0.52 ± 0.03
0.18 ± 0.02
0.10 ± 0.01
0.60 ± 0.10
0.40 ± 0.12
0.10 ± 0.01
0.20 ± 0.01
0.10 ± 0.02
IgG2b
0.31 ± 0.01
0.32 ± 0.13
0.23 ± 0.01
1.20 ± 0.23
1.29 ± 0.32
0.10 ± 0.01
1.12 ± 0.32
1.34 ± 0.02
1.31 ± 0.12
0.58 ± 0.10
1.46 ± 0.23
0.78 ± 0.32
IgG3
0.13 ± 0.03
0.13 ± 0.02
0.14 ± 0.01
0.09 ± 0.01
0.18 ± 0.01
0.21 ± 0.02
0.41 ± 0.03
0.28 ± 0.01
0.58 ± 0.10
0.08 ± 0.01
0.32 ± 0.03
0.2 ± 0.04

p17 Peptide

IgG1
0.58 ± 0.10
0.64 ± 0.24
0.65 ± 0.03
0.72 ± 0.18
0.70 ± 0.17
0.84 ± 0.34
0.64 ± 0.28
0.79 ± 0.03
0.63 ± 0.16
0.69 ± 0.18
0.60 ± 0.10
0.70 ± 01.8
IgG2a
0.85 ± 0.20
0.89 ± 0.32
0.90 ± 0.09
0.80 ± 0.02
1.01 ± 0.04
0.83 ± 0.34
0.85 ± 0.32
1.07 ± 0.22
0.81 ± 0.31
0.70 ± 0.18
1.01 ± 0.15
0.77 ± 0.24
IgG2b
0.61 ± 0.21
0.79 ± 0.17
0.61 ± 0.09
0.71 ± 0.14
1.16 ± 0.12
1.28 ± 0.16
0.71 ± 0.09
1.18 ± 0.02
1.31 ± 0.23
0.61 ± 0.03
0.87 ± 0.21
1.29 ± 0.23
IgG3
0.46 ± 0.15
0.45 ± 0.14
0.35 ± 0.12
0.40 ± 0.20
0.52 ± 0.21
0.59 ± 0.15
0.40 ± 0.12
0.48 ± 0.08
0.51 ± 0.01
0.59 ± 0.32
0.52 ± 0.10
0.50 ± 0.13

p24 Peptide

IgG1
0.34 ± 0.01
0.30 ± 0.08
0.35 ± 0.02
0.70 ± 0.16
0.42 ± 0.12
0.53 ± 0.14
0.49 ± 0.12
0.27 ± 0.03
0.47 ± 0.05
0.89 ± 0.05
0.32 ± 0.04
0.48 ± 0.15
IgG2a
0.59 ± 0.13
0.46 ± 0.15
0.48 ± 0.14
0.73 ± 0.15
0.93 ± 0.23
0.90 ± 0.32
0.76 ± 0.23
1.06 ± 0.40
0.80 ± 0.20
0.60 ± 0.13
0.94 ± 0.16
0.88 ± 0.15
IgG2b
0.46 ± 0.17
0.72 ± 0.08
0.89 ± 0.23
0.40 ± 0.02
0.90 ± 0.04
0.91 ± 0.09
0.56 ± 0.17
0.90 ± 0.23
1.07 ± 0.32
0.80 ± 0.10
0.96 ± 0.16
1.02 ± 0.32
IgG3
0.58 ± 0.19
0.40 ± 0.08
0.42 ± 0.05
0.36 ± 0.02
0.32 ± 0.05
0.35 ± 0.05
0.52 ± 0.09
0.40 ± 0.13
0.35 ± 0.09
0.53 ± 0.04
0.37 ± 0.10
0.34 ± 0.12

Table 1B (H-2k)

Formulation
Peptide in Alum
Peptide in Liposomes
Peptide with MA729 in Liposomes
Peptide in ISCOMs

Isotype ↓ Bleed →
I
II
III
I
II
III
I
II
III
I
II
III

V3-gp41 Peptide

IgG1
0.46 ± 0.02
0.28 ± 0.03
0.42 ± 0.13
0.10 ± 0.04
0.60 ± 0.10
0.63 ± 0.20
0.47 ± 0.15
0.62 ± 0.12
0.38 ± 0.09
0.26 ± 0.07
0.78 ± 0.12
0.67 ± 0.20
IgG2a
0.91 ± 0.23
0.46 ± 0.09
0.27 ± 0.07
0.93 ± 0.21
0.90 ± 0.32
0.40 ± 0.09
0.50 ± 0.07
0.83 ± 0.03
0.70 ± 0.04
0.54 ± 0.14
0.80 ± 0.15
0.84 ± 0.16
IgG2b
0.73 ± 0.18
0.62 ± 0.19
0.90 ± 0.29
1.32 ± 0.30
1.24 ± 0.34
1.08 ± 0.32
0.70 ± 0.10
1.07 ± 0.20
1.35 ± 0.27
0.70 ± 0.17
0.80 ± 0.19
0.95 ± 0.16
IgG3
0.26 ± 0.02
0.17 ± 0.03
0.61 ± 0.04
0.26 ± 0.09
0.31 ± 0.10
0.29 ± 0.04
0.16 ± 0.03
0.37 ± 0.04
0.18 ± 0.08
0.24 ± 0.08
0.16 ± 0.02
0.26 ± 0.02

gp41 Peptide

IgG1
0.10 ± 0.03
0.11 ± 0.04
0.20 ± 0.05
0.73 ± 0.16
1.04 ± 0.24
0.70 ± 0.26
0.40 ± 0.06
1.27 ± 0.43
1.28 ± 0.35
0.60 ± 0.02
0.30 ± 0.02
0.06 ± 0.01
IgG2a
0.12 ± 0.01
0.24 ± 0.10
0.20 ± 0.04
0.63 ± 0.09
1.27 ± 0.26
1.02 ± 0.29
0.47 ± 0.19
1.35 ± 0.09
1.41 ± 0.12
0.69 ± 0.16
0.79 ± 0.11
0.60 ± 0.10
IgG2b
0.25 ± 0.08
0.26 ± 0.09
0.27 ± 0.07
0.94 ± 0.20
1.31 ± 0.30
1.23 ± 0.19
1.32 ± 0.20
1.37 ± 0.41
1.39 ± 0.32
0.97 ± 0.10
1.14 ± 0.19
1.24 ± 0.16
IgG3
0.17 ± 0.20
0.07 ± 0.16
0.10 ± 0.03
0.70 ± 0.09
0.47 ± 0.07
0.30 ± 0.03
0.37 ± 0.03
0.47 ± 0.22
0.58 ± 0.06
0.40 ± 0.03
0.31 ± 0.01
0.25 ± 0.08

p17 Peptide

IgG1
0.45 ± 0.10
0.53 ± 0.03
0.50 ± 0.14
0.60 ± 0.17
0.67 ± 0.19
0.70 ± 0.03
0.53 ± 0.12
0.60 ± 0.18
0.50 ± 0.11
0.51 ± 0.10
0.61 ± 0.14
0.59 ± 0.09
IgG2a
0.44 ± 0.03
0.79 ± 0.13
0.60 ± 0.16
0.60 ± 0.08
0.82 ± 0.23
0.68 ± 0.11
0.50 ± 0.10
0.83 ± 0.07
0.67 ± 0.01
0.50 ± 0.02
0.63 ± 0.17
0.60 ± 0.02
IgG2b
0.38 ± 0.02
0.65 ± 0.16
0.53 ± 0.03
0.48 ± 0.02
1.09 ± 0.19
1.05 ± 0.18
0.45 ± 0.10
1.05 ± 0.28
1.07 ± 0.21
0.46 ± 0.31
0.72 ± 0.26
1.07 ± 0.20
IgG3
0.24 ± 0.09
0.32 ± 0.06
0.21 ± 0.02
0.35 ± 0.08
0.43 ± 0.10
0.45 ± 0.07
0.20 ± 0.01
0.36 ± 0.08
0.38 ± 0.03
0.30 ± 0.02
0.33 ± 0.06
0.35 ± 0.02

p24 Peptide

IgG1
0.28 ± 0.03
0.38 ± 0.07
0.31 ± 0.03
0.40 ± 0.10
0.59 ± 0.04
0.51 ± 0.16
0.40 ± 0.18
0.50 ± 0.15
0.42 ± 0.12
0.40 ± 0.12
0.60 ± 0.23
0.42 ± 0.23
IgG2a
0.52 ± 0.21
0.66 ± 0.22
0.69 ± 0.11
0.60 ± 0.09
0.70 ± 0.09
0.62 ± 0.16
0.40 ± 0.06
0.76 ± 0.03
0.78 ± 0.14
0.80 ± 0.10
0.77 ± 0.21
0.48 ± 0.08
IgG2b
0.51 ± 0.07
0.54 ± 0.03
0.58 ± 0.09
0.70 ± 0.16
0.81 ± 0.03
0.90 ± 0.31
0.70 ± 0.26
0.92 ± 0.21
0.60 ± 0.22
0.80 ± 0.21
0.97 ± 0.17
0.45 ± 0.05
IgG3
0.34 ± 0.10
0.32 ± 0.09
0.31 ± 0.01
0.36 ± 0.10
0.88 ± 0.07
0.64 ± 0.21
0.48 ± 0.01
0.52 ± 0.09
0.69 ± 0.16
0.60 ± 0.20
0.72 ± 0.19
0.44 ± 0.09

Table 1C (H-2q)

Formulation
Peptide in Alum
Peptide in Liposomes
Peptide with MA729 in Liposomes
Peptide in ISCOMs

Isotype↓ Bleed →
I
II
III
I
II
III
I
II
III
I
II
III

V3-gp41 peptide

IgG1
0.18 ± 0.07
0.14 ± 0.02
0.17 ± 0.03
0.14 ± 0.01
0.10 ± 0.01
0.36 ± 0.06
0.13 ± 0.02
0.32 ± 0.12
0.33 ± 0.03
0.51 ± 0.02
0.63 ± 0.11
0.70 ± 0.09
IgG2a
0.26 ± 0.06
0.45 ± 0.05
0.56 ± 0.07
0.70 ± 0.02
0.77 ± 0.01
0.89 ± 0.10
0.95 ± 0.21
0.93 ± 0.12
0.90 ± 0.10
1.23 ± 0.09
1.16 ± 0.02
1.31 ± 0.20
IgG2b
0.64 ± 0.05
0.56 ± 0.06
0.38 ± 0.07
0.90 ± 0.21
0.95 ± 0.09
1.30 ± 0.16
0.94 ± 0.14
0.96 ± 0.23
1.31 ± 0.33
1.24 ± 0.20
1.34 ± 0.14
1.10 ± 0.27
IgG3
0.12 ± 0.02
0.10 ± 0.01
0.19 ± 0.03
0.11 ± 0.01
0.17 ± 0.04
0.23 ± 0.03
0.15 ± 0.06
0.26 ± 0.17
0.34 ± 0.08
0.10 ± 0.02
0.20 ± 0.01
0.70 ± 0.03

gp41 Peptide

IgG1
0.24 ± 0.01
0.23 ± 0.04
0.06 ± 0.01
0.41 ± 0.09
0.42 ± 0.06
0.32 ± 0.02
0.34 ± 0.10
0.40 ± 0.16
0.36 ± 0.10
0.30 ± 0.03
0.31 ± 0.10
0.24 ± 0.05
IgG2a
0.52 ± 0.04
0.57 ± 0.05
0.60 ± 0.05
0.65 ± 0.04
0.77 ± 0.07
0.89 ± 0.08
0.60 ± 0.10
1.28 ± 0.09
0.95 ± 0.18
0.84 ± 0.21
0.73 ± 0.30
0.65 ± 0.17
IgG2b
0.67 ± 0.31
0.72 ± 0.08
0.25 ± 0.02
1.40 ± 0.15
1.35 ± 0.19
1.01 ± 0.21
1.14 ± 0.22
1.09 ± 0.34
1.46 ± 0.52
0.91 ± 0.19
0.82 ± 0.21
0.72 ± 0.08
IgG3
0.18 ± 0.06
0.28 ± 0.03
0.23 ± 0.02
0.51 ± 0.03
0.51 ± 0.06
0.30 ± 0.01
0.28 ± 0.06
0.28 ± 0.07
0.53 ± 0.17
0.29 ± 0.03
0.32 ± 0.16
0.46 ± 0.20

p17 Peptide

IgG1
0.34 ± 0.08
0.32 ± 0.02
0.24 ± 0.17
0.76 ± 0.16
0.30 ± 0.07
0.34 ± 0.01
0.38 ± 0.02
0.26 ± 0.01
0.30 ± 0.06
0.39 ± 0.09
0.29 ± 0.02
0.28 ± 0.01
IgG2a
0.51 ± 0.01
0.36 ± 0.04
0.38 ± 0.06
0.72 ± 0.02
0.90 ± 012
0.88 ± 0.21
0.74 ± 0.15
0.92 ± 0.10
0.89 ± 0.19
0.56 ± 0.12
1.03 ± 0.02
0.86 ± 0.20
IgG2b
0.46 ± 0.02
0.71 ± 0.08
0.88 ± 0.09
0.50 ± 0.23
0.95 ± 0.32
0.91 ± 0.30
0.55 ± 0.23
0.92 ± 0.32
0.94 ± 0.28
0.52 ± 0.09
0.99 ± 0.21
1.05 ± 0.21
IgG3
0.56 ± 0.01
0.42 ± 0.14
0.40 ± 0.15
0.56 ± 0.08
0.32 ± 0.02
0.36 ± 0.05
0.32 ± 0.07
0.27 ± 0.08
0.35 ± 0.05
0.34 ± 0.12
0.40 ± 0.11
0.34 ± 0.10

p24 Peptide

IgG1
0.40 ± 0.05
0.44 ± 0.08
0.38 ± 0.02
0.30 ± 0.03
0.70 ± 0.10
0.60 ± 0.11
0.61 ± 0.08
0.32 ± 0.03
0.42 ± 0.06
0.29 ± 0.06
0.76 ± 0.13
0.50 ± 0.02
IgG2a
0.54 ± 0.11
0.62 ± 0.21
0.61 ± 0.06
0.76 ± 0.03
0.88 ± 0.05
1.04 ± 0.18
0.67 ± 0.02
1.07 ± 0.18
1.09 ± 0.21
0.63 ± 0.21
1.00 ± 0.20
1.10 ± 0.17
IgG2b
0.36 ± 0.08
0.32 ± 0.04
0.55 ± 0.04
0.69 ± 0.14
1.08 ± 0.16
0.90 ± 0.19
0.72 ± 0.07
1.18 ± 0.13
1.16 ± 0.22
1.60 ± 0.07
1.19 ± 0.03
0.90 ± 0.09
IgG3
0.31 ± 0.03
0.57 ± 0.07
0.38 ± 0.03
0.46 ± 0.04
0.49 ± 0.09
0.50 ± 0.10
0.31 ± 0.04
0.48 ± 0.05
0.42 ± 0.11
0.52 ± 0.23
0.54 ± 0.02
0.32 ± 0.10

Table 1D (H-2d)

Formulation
Peptide in Alum
Peptide in Liposomes
Peptide with MA729 in Liposomes
Peptide in ISCOMs

Isotype↓ Bleed →
I
II
III
I
II
III
I
II
III
I
II
III

V3-gp41 peptide

IgG1
0.33 ± 0.03
0.27 ± 0.02
0.42 ± 0.03
0.65 ± 0.08
0.52 ± 0.02
0.47 ± 0.02
0.30 ± 0.01
0.10 ± 0.06
0.10 ± 0.01
0.21 ± 0.09
0.28 ± 0.02
0.45 ± 0.05
IgG2a
0.49 ± 0.02
0.59 ± 0.11
0.91 ± 0.19
0.69 ± 0.04
1.03 ± 0.09
1.93 ± 0.19
0.46 ± 0.10
0.70 ± 0.20
0.38 ± 0.04
0.54 ± 0.03
0.40 ± 0.07
0.80 ± 0.01
IgG2b
0.97 ± 0.03
1.81 ± 0.12
1.70 ± 0.21
1.10 ± 0.21
1.74 ± 0.20
1.47 ± 0.03
1.70 ± 0.32
1.32 ± 0.21
0.90 ± 0.08
1.76 ± 0.03
1.24 ± 0.08
1.80 ± 0.14
IgG3
0.35 ± 0.08
0.27 ± 0.04
0.51 ± 0.18
0.70 ± 0.15
0.40 ± 0.08
0.65 ± 0.05
0.30 ± 0.04
0.65 ± 0.02
0.32 ± 0.02
0.29 ± 0.08
0.45 ± 0.03
0.42 ± 0.02

gp41 Peptide

IgG1
0.13 ± 0.03
0.17 ± 0.02
0.12 ± 0.03
0.63 ± 0.06
0.91 ± 0.05
0.43 ± 0.13
0.44 ± 0.04
0.97 ± 0.23
1.20 ± 0.21
0.30 ± 0.20
0.40 ± 0.01
0.52 ± 0.10
IgG2a
0.23 ± 0.10
0.34 ± 0.07
0.36 ± 0.09
0.87 ± 0.03
0.90 ± 0.05
1.01 ± 0.09
0.54 ± 0.15
1.45 ± 0.19
1.60 ± 0.28
0.76 ± 0.17
0.83 ± 0.18
0.76 ± 0.13
IgG2b
0.36 ± 0.12
0.45 ± 0.01
0.43 ± 0.06
1.23 ± 0.02
1.21 ± 0.01
1.10 ± 0.04
1.34 ± 0.09
1.43 ± 0.03
1.49 ± 0.43
1.04 ± 0.09
0.97 ± 0.12
0.80 ± 0.21
IgG3
0.17 ± 0.03
0.07 ± 0.01
0.10 ± 0.02
0.34 ± 0.03
0.57 ± 0.08
0.74 ± 0.12
0.54 ± 0.16
0.67 ± 0.09
0.60 ± 010
0.48 ± 0.02
0.67 ± 0.13
0.60 ± 0.03

p17 Peptide

IgG1
0.19 ± 0.01
0.36 ± 0.05
0.28 ± 0.06
0.02 ± 0.01
0.65 ± 0.21
0.50 ± 0.02
1.21 ± 0.09
0.50 ± 0.10
0.67 ± 0.12
0.23 ± 0.02
0.55 ± 0.19
0.81 ± 0.09
IgG2a
0.27 ± 0.03
0.40 ± 0.03
0.61 ± 0.12
0.95 ± 0.25
0.92 ± 0.21
0.72 ± 0.01
0.85 ± 0.10
0.95 ± 0.17
0.86 ± 0.18
0.77 ± 0.18
0.98 ± 0.16
0.90 ± 0.32
IgG2b
0.49 ± 0.07
0.68 ± 0.09
0.69 ± 0.07
0.82 ± 0.06
0.85 ± 0.05
0.99 ± 0.24
0.87 ± 0.14
0.95 ± 0.32
0.97 ± 0.21
0.63 ± 0.01
1.05 ± 0.20
1.15 ± 0.22
IgG3
0.31 ± 0.06
0.40 ± 0.04
0.40 ± 0.12
0.28 ± 0.02
0.24 ± 0.02
0.23 ± 0.01
0.25 ± 0.08
0.21 ± 0.01
0.21 ± 0.04
0.28 ± 0.10
0.14 ± 0.01
0.22 ± 0.02

p24 Peptide

IgG1
0.24 ± 0.01
0.41 ± 0.10
0.43 ± 0.18
0.20 ± 0.06
0.68 ± 0.03
0.57 ± 0.08
0.24 ± 0.10
0.61 ± 0.01
0.66 ± 0.14
0.22 ± 0.01
0.53 ± 0.12
0.60 ± 0.12
IgG2a
0.40 ± 0.07
0.53 ± 0.03
0.60 ± 0.03
0.97 ± 0.07
0.99 ± 0.21
0.81 ± 016
0.95 ± 0.12
1.08 ± 0.17
0.98 ± 0.07
0.90 ± 0.22
0.96 ± 0.19
0.95 ± 0.09
IgG2b
0.49 ± 0.02
0.67 ± 0.02
0.69 ± 0.12
0.84 ± 0.21
0.85 ± 0.12
0.98 ± 0.21
0.60 ± 0.08
0.93 ± 0.02
1.25 ± 0.02
0.62 ± 0.11
1.05 ± 0.22
1.15 ± 0.09
IgG3
0.31 ± 0.03
0.39 ± 0.12
0.40 ± 0.12
0.20 ± 01
0.31 ± 0.09
0.33 ± 0.02
0.24 ± 0.01
0.25 ± 0.05
0.21 ± 0.03
0.28 ± 0.02
0.24 ± 0.08
0.24 ± 0.01

IgG2a,2b,2c and IgG3 were determined using ELISA in all the three bleeds for all the four peptides in different antigenic formulations using the isotyping kit. The O.D. values represent mean. ± SEM of four mice for the bleeds obtained on 27th (I), 42nd(II), and 60th (III) day.

Agrawal et al. Journal of Immune Based Therapies and Vaccines 2003 1:5   doi:10.1186/1476-8518-1-5